学校始建于1943年，原名南京市私立昌明中学，1951年和励群中学合并，定名私立城南中学，1956年命名为南京市第二十七中学，2005年由原南京市第二十七中学和原南京市第四十二中学合并，组建为南京市第二十七高级中学。学校位于南京夫子庙商业核心区。学校一校两区：夫子庙校区（平江府路166号）、武定校区（武定新村5号），现有30个教学班。占地41500平方米，校舍面积26816.9平方米，拥有现代化的教育教学设施。因为这里曾是江南贡院和钟山书院的所在，所以，富有灵性、充满传奇。